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          標準曲線的繪制

          標準曲線的繪制方法
           
          可以采用各種繪圖軟件來繪制ELISA標準曲線,下面以“Curve  Expert1.4”軟件為例,繪制ELISA標準曲線的方法如下;
          1.啟動“Curve  Expert”
          (點擊下載Curve Expert1.3.zip 或下載升級版Curve Expert1.4.zip)
          2.X軸輸入標準品的OD值,Y軸輸入所對應的濃度值,如圖:

           
           
          3.單擊[運行]  按鈕,出現如下對話框

           
          4.單擊[ok]按鈕,出現如下兩個對話框,關閉下面一個對話框
           

           
          5. 在對話框的右上角出現一些曲線的名稱,從“1”開始依次點擊曲線名稱,在右下角會出現相應擬合的曲線。
           
           
           
           
          6. 根據擬合的曲線選取ELISA擬合度最佳的曲線雙擊,出現如下對話框:
          注意:選擇系數(即“r”值)最好的曲線方程來進行運算。在下面的對話框
          右上角有“r”值 ,當“r”值越接近1擬合度越好
           

           
           
          7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現如下對話框:

           
           
          8.輸入標準的OD值,單擊[Calculate]按忸,即可得到待測蛋白的實際含量(標本稀釋了N倍,運算出的數值應在乘以N)。
           
          9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,可在步驟6的對話框空白處右擊,選擇”Information”

           
           
          10. 得到如下對話框:點擊“Copy”
           
          在你需要的位置粘貼即可得到如下數據:
          Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)
          Coefficient Data:
          a =   -21.531017
          b =  212.05019
          c =  -0.24054479
          d =  0.018060778


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